通过利用CRISPR-Cas9基因编辑技术排查分析,研究团队锁定了一个名为组织因子途径抑制因子(TFPI)的蛋白,认为它很可能是这两种毒素B亚型进入细胞的“另一扇门”。
陶亮介绍,为了验证这一猜想,研究团队设计并进行了各种不同类型的实验。包括敲除TFPI这扇“大门”,看TcdB4能否闯入细胞;利用冷冻电镜单颗粒三维重构技术,从分子水平直接观察毒素和受体的结合;构建“TFPI诱饵”诱捕毒素,看能否保护细胞和实验动物不受伤害。
这些实验结果不仅证实TFPI是艰难梭菌超毒力分支的TcdB在肠道上皮中的受体,更预示了TFPI作为中和蛋白在防治超毒力艰难梭菌感染中的潜在应用价值。